肉的宰后嫩化最主要的归因于肌原人造合成黏胶纤维的结构特征的破环，肌原人造合成黏胶纤维的结构特征是由内源性核血清淀粉水解生理反应酶化学溶解肌原人造合成黏胶纤维和体肿瘤内部骨架核血清引起的。与一百多年来总是是喜爱重要的钙核血清酶不同于，胱天核血清酶（caspases）附近称得上感欲望来说题。胱天核血清酶在体肿瘤内部凋亡的实行环节起着比较重要性的效应，各举caspase-3在人死之后核血清淀粉水解生理反应中的效应是几地方和麻烦的，于是指的进一部学习。S-亚硝基化实现调低钙解放、能源基础代谢、核血清质化学溶解和体肿瘤内部凋亡来调低肉肥，包含嫩度和持水本事。先期学习遇到S-亚硝基化会再降依靠线粒体的caspase-3级联生理反应，这或者是肩部肌肉体肿瘤内部凋亡和羊肉品性影响的主要原因。caspase-3的学习重要是其与体肿瘤内部凋亡的的关联，当然，较少有学习刍议S-亚硝基化调低caspase-3的长效机制。

2024年9月由沈阳农林业高中张万刚副教授拜谱生物在期刊Journal of Agricultural and Food Chemistry发表题为“Exploring the Effects of S‑Nitrosylation on Caspase‑3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro”文章，研究发现了GSNO处理后caspase-3的活性显著降低（P < 0.05），并表现出剂量依赖性的抑制作用，其在半胱氨酸116、170、184、220和264位点被S-亚硝基化，进一步抑制了其对牛肉肌原纤维蛋白的蛋白水解能力。拜谱怪物为该研究提供了亚硝基化呈现组学拜谱生物，助力发现目的蛋白上的亚硝基化修饰位点。

中文名字名称：体外研究S-亚硝基化对牛肉Caspase-3修饰和肌原纤维降解的影响

杂志期刊：Journal of Agricultural and Food Chemistry

2026年关系要素：5.7

文章发表时间段：2024年9月

客的单位：南京农业大学

研发的材料：蛋白

拜谱打造技巧：亚硝基化修饰组学

高技术风格：

一、设计毕竟

01.Caspase-3化学活化

近年来尚不清除NO对caspase-3的缓和能力有没归因于NO介导的S-亚硝基化，有所差异质量浓度均值的GSNO是外源性NO供给，以诱导性caspase-3的身体外S-亚硝基化。可是取决于，与没能GSNO的组不同于，100、200和400μM GSNO组的caspase-3灵渗透性更为明显减小（图1），与原本报道范文同样。GSNO净化处理减小caspase-3灵渗透性的隐性主观原因仍有待于体现了。

图1 各种盐浓度的GSNO正确处理对caspase-3化学活化的损害

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

02.Caspase-3的S-亚硝基化成度

设计Caspase-3的亚硝基化的情况，以阐述GSNO对Caspase-3的作用性。经GSNO工作后，在线探测到caspase-3球蛋白S-亚硝基化效果提升（图2）。这样结杲表示，外源性GSNO塑造可成功的诱发caspase-3的身体S-亚硝基化。可笑目瞪口呆的是，在没能GSNO会出现的差表组中在线探测到同一个绚烂的S-亚硝基化带，这表示caspase-3也许形成内源性的S-亚硝基化。虽然，本设计中caspase-3的S-亚硝基化的情况较高，而caspase-3的活性氧有效降低，这与前面的设计共同。或许，caspase-3的特男人S-亚硝基化掩盖位点尚不清，还还要进这一步的探求。

图2 GSNO加工对caspase-3S-亚硝基化能力的干扰

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

03.Caspase-3的S-亚硝基化位点

通过亚硝基化修饰语组学检测caspase-3的S-亚硝基化位点。结果表明，caspase-3上的4个多肽中有5个半胱氨酸残基被蛋白S-亚硝基化修饰（图3）。亚硝基化半胱氨酸定位于SSFVCVLLSHGEEGIIFGTNGPVDLK,GTELDCGIETDSGVDDDMACHKIPVEADFLYAYSTAPGYYSWR,DGSWFIQSLCAMLK和KQIPCIVSMLTK的多肽中，分别位于116、170、184、220和264位。S-亚硝基化caspase-3多肽的MS1和MS2光谱显示Caspase-3是一种具有8个半胱氨酸残基的半胱氨酸蛋白酶，其中5个半胱氨酸被发现被亚硝基化，说明Caspase-3易受亚硝基化修饰（图4）。此外，据先前报道casase-3的催化残留亚硝基化Cys163，这不同于本研究的结果。S-亚硝基化caspase-3的丰度、位点的修饰水平和检测方法的灵敏度的差异可能是导致结果不一致的原因之一。可以推断，半胱氨酸蛋白酶活性的调节可能是由NO和蛋白S-亚硝基化介导的，这可能影响蛋白降解，促进死后衰老。

图 3 caspase-3的字段。绿色符号的字段表明S-亚硝基化肽，粉红色符号的C表明S-亚硝基化半胱氨酸

(图源：Hou, Qin et al., JAgric Food Chem.. 2024)

图4. s-亚硝基化肽和caspase-3位点的MS1和MS2光谱分析

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

04.S-亚硝基化Caspase-3可降解结蛋白质

结球核蛋清当做一种生活必要的人体神经细胞骨架球核蛋清，在达到肌人体神经细胞型式的型式全面性和膨胀性各方面起着必要效用，论述S-亚硝基化caspase-3对结球核蛋清吸附的的敏单纯具备着必要作用。与Std（未用胱天球核蛋清酶-3和GSNO孵育的默认肌玻纤材料球核蛋清）组较之，0 μM GSNO组（肌原玻纤材料和caspase-3的孵育，无GSNO）的全面结球核蛋清氧浓度相关性减小，的提示caspase-3对结球核蛋清具备着未知的球核蛋清溶解程度。在GSNO孵育后，全面结球核蛋清的氧浓度看不出上升（P < 0.05）。最后，当GSNO氧浓度提高时，全面结球核蛋清的氧浓度延续上浮（P < 0.05）（图5）。某一知道表面，SNO遮盖的caspase-3以程度依赖症的具体方法克制结球核蛋清的吸附。

图5.S-亚硝基化caspase-3降解塑料结蛋白质

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

05.S-亚硝基化Caspase- 3化学降解肌钙蛋白酶-T

肌钙核血清质酶酶-T (TnT)是原肌球核血清质酶酶调准器担任手臂肌肉收缩毛孔的细条的一定肌原玻璃仟维核血清质酶酶。TnT的化学挥发特殊性是检验到28和30 kDa的TnT。在亚硝基化生活条件下，caspase-3对TnT的化学挥发状况就像文中6已知，与Std组（中含caspase-3和GSNO的肌原玻璃仟维）相对比，caspase-3组中30 kDa TnT电影精彩片段显著性性多，证明caspase-3经由了TnT的化学挥发，与此同时，caspase-3与GSNO的孵育出现30 kDa TnT的大幅度降底。在100和200 μM GSNO组互相不会有检验到明显的的区别(P > 0.05)，而当GSNO的氧浓度符合400 μM 时，该电影精彩片段显著性性变少(P < 0.05)。许多出现证明了SNO绘制的caspase-3对TnT化学挥发的抑自制用效应。结核血清质酶酶和TnT是caspase-3的刺激性底物，而GSNO外理大幅度降底caspase-3的生物可能出现肌原玻璃仟维核血清质酶酶化学挥发水平大幅度降底。结合以上上述一系列的，NO诱导型的S-亚硝基化就能够经由绘制半胱氨酸残基来调准器caspase-3的生物，从根本上进一次危害其对结核血清质酶酶和TnT的核血清质酶酶电离力量，然后危害羊肉品质质量。

图6. S-亚硝基化caspase- 3吸附肌钙核蛋白-T

(图源：Hou, Qin et al., J Agric Food Chem.. 2024)

二、总结ppt

本的研究我委初探S-亚硝基化对caspase-3绘制的会干扰还有其马上又对牛羊肉肌原钎维身体溶解的会干扰。血清S-亚硝基化能绘制caspase-3的半胱氨酸残基，因此引致caspase-3活性酶调低，进每一步压制了其对牛羊肉肌原钎维血清的血清溶解力量。

三、拜谱总结ppt

探索采用了了酶活检查，亚硝基化体现语组学分享，WB等检查策略，出现 球核脂肪酸质S-亚硝基化能否体现语caspase-3的半胱氨酸残基，这造成 了caspase-3生物的减轻，并举每一步克制了其对牛肉片肌原植物纤维球核脂肪酸质的球核脂肪酸质电离学习能力。本探索为表述球核脂肪酸质质亚硝基化对吃起来的调整制度展示了个新的视野。

拜谱生物作为一家国内领先的多组学服务公司，可提供完善成熟的蛋清质组学、绘制蛋清质组学、排泄组学、转录组学等多组学产品技术服务体系，整合多组学数据进行深入挖掘分析，全面解析机制机理等，助力高分文章发表。除此之外，拜谱生物还可提供半胱氨酸新产品新产品，包括亚硝基化、谷胱甘肽化、硫巯基化、次磺碱化、total氧化的回归、分离巯基，欢迎大家咨询！

学习论文：

Qin Hou, Chao Ma, Rui Liu, Zhuangli Kang, and Wangang Zhang.Exploring the Effects of S-Nitrosylation on Caspase-3 Modification and Myofibril Degradation of Beef In Vitro. Journal of Agricultural and Food Chemistry. doi.org/10.1021/acs.jafc.4c06663